二、生化及免疫學(xué)檢驗：5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌，其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種，附睪中含高濃度的肉堿，主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)。現(xiàn)認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化，常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常，表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%，而果糖含量降低，則提示精囊功能障礙，附睪功能正常；精漿肉堿約為正常含量的50%左右，果糖含量正常，說明附睪功能障礙，精囊功能正常；而肉堿急劇下降，果糖含量亦減少，表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性?！九R床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活動，干擾精子的運行，阻礙精子穿透及精卵結(jié)合，使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精，也可能影響發(fā)育中的胚胎，造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%，當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時，系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，前向性（STR）?：平均路徑的直線性。南京牛精子分析W.H.O 4

精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數(shù)板上，在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數(shù)板內(nèi)，計數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。北京快速運動精子分析WOB精子分析儀因其高效、J準(zhǔn)的特點，已經(jīng)在眾多醫(yī)療機構(gòu)中廣泛應(yīng)用，深受患者信賴。

精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前，常用的檢測方法有手動計數(shù)法、顯微鏡計數(shù)法、電子顯微鏡計數(shù)法、精子運動軌跡分析法等。手動計數(shù)法是通過顯微鏡手動計算精液中精子數(shù)量的方法，該方法簡單易行，但因操作者技能不同，容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法比手動計數(shù)法更加準(zhǔn)確，但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗。電子顯微鏡計數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法，該方法非常準(zhǔn)確，但需要昂貴的設(shè)備。精子運動軌跡分析法是通過計算機分析精子運動軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法，該方法不僅準(zhǔn)確性，而且可以直觀地顯示精子的運動狀態(tài)，但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見的檢測方法，還有一些新興的檢測方法，如流式細胞術(shù)、全自動分析系統(tǒng)等。這些檢測方法雖然在檢測精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢，但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴，目前還沒有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測方法時，需要考慮檢測的目的、檢測的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時，需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機構(gòu)進行檢測，避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過關(guān)等因素導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算，從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)，了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等，使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開機接通電源，打開計算機輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中，置顯微鏡操作平臺上，點擊“活動顯示”菜單，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測標(biāo)本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單，系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結(jié)束后，可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂，用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用。上海綿羊精子分析BCF

WHO第6版明確提出：使用CASA系統(tǒng)須遵循適當(dāng)?shù)某绦虿襟E，才能獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。南京牛精子分析W.H.O 4

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時內(nèi)活動精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標(biāo)定論，應(yīng)對精子數(shù)量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。南京牛精子分析W.H.O 4