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瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去，同時(shí)，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者，通過(guò)檢測(cè)MIA和S100B表達(dá)水平對(duì)黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說(shuō)，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來(lái)源上的延伸，進(jìn)一步豐富了檢測(cè)手段，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會(huì)在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。外泌體本身的惰性相當(dāng)高，但它們與細(xì)胞膜...

一方面，外泌體可以通過(guò)調(diào)控細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化如細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)HCC的發(fā)生和發(fā)展。另一方面，惡性瘤細(xì)胞分泌的外泌體可以協(xié)同其他瘤細(xì)胞一起，調(diào)控瘤微環(huán)境，以利于HCC發(fā)展。人HCC細(xì)胞外泌體中含有的一系列miRNAs，會(huì)減弱其他HCC細(xì)胞中TGF-β通路上的蛋白表達(dá)，促進(jìn)HCC細(xì)胞的生長(zhǎng)。HCC細(xì)胞外泌體還會(huì)誘導(dǎo)非致瘤性肝細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞遷移和侵襲，具有運(yùn)動(dòng)能力的HCC通過(guò)釋放外泌體誘導(dǎo)肝細(xì)胞分泌MMP-2和MMP-9，增強(qiáng)HCC細(xì)胞的侵襲能力。經(jīng)HCC中分離到的CD90+外泌體處理的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)表達(dá)更多的VEGF和VEGFR1，促進(jìn)血管生成；同時(shí)誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移。還有研究表明外...

事實(shí)上，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后，注射來(lái)源于間充質(zhì)干細(xì)胞、心臟祖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或心肌源性細(xì)胞的外泌體均可改善心臟功能，減輕心臟纖維化，刺激血管生成。例如，心源性細(xì)胞外泌體能通過(guò)特異性的巨噬細(xì)胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護(hù)作用。心臟再灌注后，CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積，而且CDCexo會(huì)減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量，并改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細(xì)胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能，并降低嚴(yán)重肢體缺血患者的截肢率。其作用機(jī)制在于：CD34+干細(xì)胞分泌的外泌體促進(jìn)小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體...

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡，其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9）、熱休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示蹤病毒使用CD63作為生物標(biāo)記，通過(guò)將CD63與熒光蛋白偶聯(lián)，帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上，便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實(shí)驗(yàn)。慢病毒載體的構(gòu)建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號(hào)、長(zhǎng)末端重復(fù)序列)和編碼反式作用蛋白的序列進(jìn)行分離。免疫印跡法（WB）和Elisa檢測(cè)法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測(cè)的一般方法。胞外囊泡與外泌體circ...

外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志，而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨(dú)特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來(lái)瘤治理中有很大的利用價(jià)值。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體，外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì)，例如酶，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)；外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾。...

肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體（LCC-exosome）可以通過(guò)刺激種瘤血管的形成來(lái)促進(jìn)種瘤的生長(zhǎng)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)開(kāi)啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。結(jié)果表明，PS親和法可以檢測(cè)到許多目前...

在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中，由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸，因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞，而后將SR4987與PTX共混，使SR4987分泌的外泌體含有PTX，再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái)，研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能，小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047～0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%，這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀...

Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹，通過(guò)終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后，10000xg離心1h，可將直徑在30-150nm之間，且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來(lái)。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體，為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體，將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后，加入非線性蔗糖密度梯度層，10000xg超速離心5h，將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀。經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證，確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來(lái)源外泌體所在密度層。外泌體具有檢測(cè)包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可用于對(duì)心血...

血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定,將血清在4°C短期保存期間即發(fā)生降解,這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的。–80°C保存被公認(rèn)是保存各種生物標(biāo)本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境,雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過(guò)程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環(huán)境下,但在處理或運(yùn)輸過(guò)程中有時(shí)很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過(guò)程中使用海藻糖作為保護(hù)劑,海藻糖可以提供生物保護(hù)作用,如穩(wěn)定蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜和脂質(zhì)體;減少冷凍過(guò)程中冰...

通過(guò)對(duì)28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進(jìn)行深度測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調(diào)，表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標(biāo)志物。Khurana等［100］將研究對(duì)象由miRNAs擴(kuò)大至多種類型RNA，通過(guò)對(duì)慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進(jìn)行系統(tǒng)研究，在慢性腎病患者組中識(shí)別出30種明顯差異的lncRNAs，表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標(biāo)志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質(zhì)能夠作為前列腺ai的新型標(biāo)志物，3種脂質(zhì)標(biāo)志物結(jié)合使...

瘤釋放的外泌體可以通過(guò)削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增，來(lái)營(yíng)造一個(gè)免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊，從而幫助瘤細(xì)胞逃過(guò)免疫系統(tǒng)的識(shí)別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥，利用基質(zhì)浸潤(rùn)細(xì)胞的反應(yīng)營(yíng)造出利于瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境。研究表明，在過(guò)去短短的5年里，對(duì)外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展。如今，收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個(gè)重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對(duì)改善病癥患者的命運(yùn)發(fā)揮出舉足輕重的影響。干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理，改善神經(jīng)預(yù)后，增加血管與神經(jīng)生成。組織外泌體脂質(zhì)組學(xué)一類外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸...

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達(dá)水平明顯上升，表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流，發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚，故給早期診斷帶來(lái)困難。高通量小RNA測(cè)序篩查了來(lái)自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達(dá)的miRNA，小RNA長(zhǎng)度在正常個(gè)體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異，膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高，而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高，為膽管ai和膽...

在免疫系統(tǒng)中，淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等均可以產(chǎn)生外泌體。研究表明免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠明顯影響機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞、免疫激huo、免疫監(jiān)督等。不同免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體功能不同，以樹(shù)突狀細(xì)胞(該細(xì)胞具有免疫刺激能力，是目前能夠激huo初始T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞)來(lái)源的外泌體為例，其外泌體的免疫刺激作用取決于來(lái)源細(xì)胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細(xì)胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ，共刺激分子如CD40、CD8、CD86和熱激蛋白，這些分子使樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體具有抗原呈遞、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、...

已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo)，根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中，從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制，通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制，分析會(huì)引起何種生理作用，這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。甚至活內(nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)（哪個(gè)外泌體遷移至何處）也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。實(shí)際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體，其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較，PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上，幾乎沒(méi)有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復(fù)性好。外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一...

科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。例如，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體，高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α，可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化。通過(guò)上述介紹可以知道癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子，神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子，因此，通過(guò)壓制或去除這些外泌體，有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展，外泌體功能逐步清晰，并擴(kuò)大臨床應(yīng)用，有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上。甚至可嘗試?yán)猛饷隗w將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中。外泌體研究相對(duì)困難，需要盡快開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。江蘇外泌體miRNA測(cè)序外泌體（Exosome），是細(xì)胞外...

小鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng)，這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外，樹(shù)突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體也能夠通過(guò)激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng)，從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物，能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)，在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。有報(bào)導(dǎo)指出，外泌體內(nèi)miRNA參與促進(jìn)血管新生、抗癥性和促進(jìn)膠原蛋白沉淀等一系列過(guò)程。吉林外泌體質(zhì)譜建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫(kù)...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫(kù)也可作為規(guī)避混亂的方法之一。干細(xì)胞外泌體circRNA測(cè)序外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護(hù)內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶...

外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-34/miR-449，促進(jìn)晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá)，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運(yùn)輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞，從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡，并通過(guò)結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteas...

外泌體(exosome)是多種活細(xì)胞經(jīng)過(guò)“內(nèi)吞–融合–外排”等一系列過(guò)程主動(dòng)向胞外分泌的直徑為30~150nm的雙層膜結(jié)構(gòu)細(xì)胞外囊泡(extracellularvesicles,EVs),廣fan存在于血液、尿液和唾液等生物體液中,并通常作為細(xì)胞間胞質(zhì)蛋白、核酸和脂質(zhì)的轉(zhuǎn)移載體發(fā)揮運(yùn)輸調(diào)控作用,被認(rèn)為是細(xì)胞間通訊的核xin部分。外泌體于1983年在HARDING等和PAN等研究羊網(wǎng)織紅細(xì)胞分化的過(guò)程中被發(fā)現(xiàn),并于1996年由RAPOSO等證實(shí)能夠作為一種細(xì)胞間通訊結(jié)構(gòu)在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮作用后得到了廣fan關(guān)注。近年來(lái),隨著外泌體在中流、心血管和感ran性疾病等多種疾病形成中的生物學(xué)作用和功能被逐...

胃病作為一種常見(jiàn)的惡性瘤,在亞洲具有較高的發(fā)病率.胃病的臨床診斷方法與結(jié)腸病相同,主要依靠?jī)?nèi)窺鏡,早期胃病的癥狀并不明顯,且臨床常用的瘤標(biāo)志物對(duì)胃病患者特異性與敏感性均較差,因此,胃病往往發(fā)現(xiàn)于晚期,并伴有不同程度的轉(zhuǎn)移。研究者發(fā)現(xiàn)胃病細(xì)胞高表達(dá)CD97并可經(jīng)外泌體分泌的方式調(diào)節(jié)瘤細(xì)胞的MAPK信號(hào)通路,促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖與侵襲。外泌體中CD97的檢測(cè)成或許能成為一種有潛在價(jià)值的胃病診療工具。胃病細(xì)胞能選擇性地將let-7包裝到外泌體中,并釋放至周圍環(huán)境中,促進(jìn)胃病的惡性進(jìn)展。胃病細(xì)胞外泌體可作用于抗瘤的T細(xì)胞,抑制AKT的活性。外泌體與免疫細(xì)胞之間的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潛在機(jī)制。在另...

Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤，有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期，標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。外泌體無(wú)法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問(wèn)題所在。浙江外泌體iTRAQ通過(guò)對(duì)28例前列腺ai癥患...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用。血細(xì)胞提取試劑盒Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞，使其分泌的外泌體負(fù)載miR-146b，并將外泌體注射至移植到小...

利用蛋白質(zhì)免疫印跡和酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)可以對(duì)外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經(jīng)典表征手段之一，操作時(shí)往往需要細(xì)胞裂解液作為陰性對(duì)照。常用的外泌體標(biāo)志性蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白質(zhì)CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白(Alix)等，內(nèi)參蛋白質(zhì)可以是肌動(dòng)蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脫氫酶，陰性對(duì)照蛋白可以是阻抑素(PHB，線粒體標(biāo)志蛋白)或鈣聯(lián)結(jié)蛋白Calnexin。在酶聯(lián)免疫吸附析法中，外泌體裂解液通過(guò)固載有抗體的固相基質(zhì)，隨后與檢測(cè)抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、...

外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-34/miR-449，促進(jìn)晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá)，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運(yùn)輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞，從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡，并通過(guò)結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteas...

已經(jīng)有許多關(guān)于外泌體作用的報(bào)導(dǎo)，根據(jù)這些現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中，從體液和培養(yǎng)上清中高純度提取的高純度外泌體，在活內(nèi)是否真的能發(fā)生作用尚未能確定。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制，通過(guò)促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制，分析會(huì)引起何種生理作用，這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向。甚至活內(nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)（哪個(gè)外泌體遷移至何處）也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。實(shí)際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體，其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較，PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上，幾乎沒(méi)有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復(fù)性好。細(xì)胞表面受體表達(dá)不同，外泌體對(duì)受體細(xì)胞的...

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-200nm，形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個(gè)堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70—90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過(guò)Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（雙鏈）但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過(guò)和靶基因mRNA堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）降解mRNA或抑制mRNA的翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá)。microRNA在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守，在動(dòng)物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達(dá)均有嚴(yán)格的組織特異性和時(shí)序性。microRNA在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程中起多種作...

外泌體是細(xì)胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過(guò)三種方式介導(dǎo)細(xì)胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細(xì)胞相互作用,通過(guò)受體–配體作用黏附到靶細(xì)胞表面,隨后被內(nèi)吞入靶細(xì)胞,或直接將內(nèi)容物釋放到靶細(xì)胞內(nèi),從而激huo靶細(xì)胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產(chǎn)生的片段可以與靶細(xì)胞的細(xì)胞表面受體結(jié)合,從而激huo靶細(xì)胞;(3)外泌體還可以與靶細(xì)胞直接接觸發(fā)生膜融合,導(dǎo)致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉(zhuǎn)移到目標(biāo)細(xì)胞,從而引起靶細(xì)胞的響應(yīng)。通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過(guò)程,比如消除胞內(nèi)陳舊分子、呈遞抗原、分化調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞或髓樣細(xì)胞以抑制免疫反應(yīng),而且還可以參與疾病形成的病理...

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息，可以通過(guò)電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細(xì)胞儀等對(duì)外泌體進(jìn)行表征。通過(guò)電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息，不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同，得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如，在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中，外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形，可能由于樣品在固定或染色過(guò)程中極度脫水，導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反，在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形，由于不會(huì)脫水變性，所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外，由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率，也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常...

外泌體是新型治理劑，惡性瘤細(xì)胞往往能夠通過(guò)分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對(duì)外泌體的質(zhì)譜研究發(fā)現(xiàn)，惡性瘤細(xì)胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR），可以抑制宿主細(xì)胞α型干擾素(IFN-α)的產(chǎn)生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下，也為晚期病癥患者的治理提供一個(gè)新的策略和理論依據(jù)。除了瘤，外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關(guān)臨床試驗(yàn)也在世界范圍內(nèi)開(kāi)展中。外泌體又存在檢測(cè)時(shí)需使用大量外泌體和難以檢測(cè)到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。復(fù)合外泌體外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖,基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作...

外泌體起源于多泡體,以細(xì)胞管腔內(nèi)囊泡的形式存在.細(xì)胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內(nèi)體小泡,在高爾基體等細(xì)胞器的作用下形成早期核內(nèi)體,早期核內(nèi)體的囊膜內(nèi)陷、突入形成多個(gè)小囊泡,并選擇性的接受細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等成分,較終形成晚期核內(nèi)體,晚期核內(nèi)體與細(xì)胞膜融合,并將外泌體排出胞外。這是一個(gè)連續(xù)而又復(fù)雜的過(guò)程,從內(nèi)體小泡到成熟外泌體,需要在各細(xì)胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神經(jīng)酰胺、膽固醇等。外泌體的排出跟其他胞內(nèi)小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調(diào)控,敲除細(xì)胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內(nèi)體的囊泡運(yùn)輸不受影...