EndoC-βH1細胞移植到小鼠體內可以逆轉化學誘導的糖尿病,EndoC-βH1細胞每百萬細胞含有0.48μg胰島素,至少80代穩定表達許多特異性β細胞標記物,沒有任何其他胰腺細胞類型標記物的大量表達。EndoC-βH1有潛力成為深入研究人類β細胞和藥物篩選的獨特工具,同時也是測試糖尿病替代細胞療法的有用臨床前模型。糖尿病細胞模型,EndoC-βH1、EndoC-βH3、EndoC-βH5等細胞dai biao了大規模藥物發現的獨特工具,為糖尿病細胞替代療法提供了臨床前模型。更多Human Cell Desgin相關產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!EndoC-B h1是一種永生細胞系,可進行反復的復蘇凍融,有效節約成本。胰島素啟動子糖尿病細胞模型慢病毒載體構建方法
HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向ZhongLiu發生開發了永生化人β細胞系,其中使用慢病毒載體整合了兩個轉基因,SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)兩種轉基因均在β細胞特異性大鼠胰島素啟動子(RIP)的控制下表達。***代細胞,名為EndoC-βH1,以組成型方式表達SV40LT和hTERT,而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,這些轉基因可在loxP介導的CRE重組后被切除,位點位于慢病毒骨架的3LTR。EndoC-βH5細胞是通過使用表達可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對人胎兒胰腺進行靶向ZhongLiu發生而獲得的.均質胰島細胞系糖尿病細胞模型類似天然胰島B細胞糖尿病細胞模型EndoC-BH1細胞檢測到B細胞轉錄因子PDX1, MAFA, NKX6-1和NEUROD1表達與人胰島細胞制備相似。
在胰島細胞刺激中,基礎和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數為11.6±1.8。通過應用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM),驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加,從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/106細胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細胞。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上(左圖),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應(右圖),對GLP-1R激動劑, Exendin4刺激產生明細那反饋, 且可實現批量化生成,實現穩定供應。
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HCD 的 EndoC-BH5 細胞系在糖尿病研究中具有較多應用,其在高葡萄糖環境下能夠表現出胰島素分泌反應,為研究胰島素調節機制和開發新型抗糖尿病藥物提供了重要支持。這些細胞模型的高穩定性和可重復性,使得研究結果更加可靠,為科學家們提供了寶貴的研究平臺。Human Cell Design 的細胞模型不僅在基礎研究中發揮重要作用,還在新藥開發和臨床前研究中具有重要應用價值。通過這些高質量的細胞模型,科學家們能夠更好地理解糖尿病的病理機制,篩選出具有潛力的新藥物,并驗證其在細胞水平上的療效。這些細胞模型為糖尿病zhi liao的創新提供了新的希望。更多關于Human Cell Design相關產品信息可以咨詢官網代理商AlibioBuy!曼聯是Human cell design在中國區的官方代理。
Humancelldesign開發了創新且安全的人類β細胞系生產方法。首先,將每個轉導的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發育的允許部位。在6到8個月內,所有移植的小鼠都發生了原發性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發性胰島素瘤中這些高度血管化的區域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達hTERT的慢病毒進行轉導,并移植到其他SCID小鼠中。這些小鼠在2至3個月內出現低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。怎么開展糖尿病研究?天津糖尿病細胞模型全球200+學術與制藥實驗室測試和批準
糖尿病細胞模型可用于胰島B細胞增殖、分化、去分化、凋亡研究。胰島素啟動子糖尿病細胞模型慢病毒載體構建方法
根據嚙齒動物β細胞獲得的數據,葡萄糖轉運蛋白SLC2A2被認為是葡萄糖感知的主要決定因素,而后來的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細胞中,GLK被認為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β細胞系。EndoC-βH1是通過將表達SV40LT的慢病毒載體轉導到人類胎兒胰腺芽中來開發的。隨后將轉導的芽移植到SCID小鼠體內,生成的表達SV40LT的細胞增殖并形成胰島素瘤。人源胰島B細胞模型對于與胰島相關的代謝疾病研究,包括糖尿病,糖尿病炎癥, 針對GLP-1R的Exendin4等類似藥物開發有重要作用。通過干細胞誘導B細胞產生的胰島B細胞存在純度較低,缺乏成熟胰島B細胞功能等問題。通過捐贈組織的胰腺B細胞提取,存在供應量較低,明顯批次效應,耗時較長等問題。使用糖尿病動物模型進行研究會比糖尿病細胞模型成本更高昂,周期更長。更多Human Cell Desgin相關產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy!胰島素啟動子糖尿病細胞模型慢病毒載體構建方法