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來源: 發布時間:2025-03-27

操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理進口的產品。遼寧認可ELISA試劑盒信息推薦

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ELISA試劑盒中的封閉液是為了減少非特異性結合而使用的。在將抗原或抗體包被在微孔板后,微孔板表面可能還存在一些未被包被的活性位點。如果不進行封閉,在加入樣本或其他試劑時,這些位點可能會與樣本中的其他物質非特異性結合,從而干擾檢測結果。封閉液通常含有一些蛋白質,如牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉等。這些蛋白質可以與微孔板上的未被包被的活性位點結合,從而封閉這些位點,減少非特異性結合的可能性。正確使用封閉液并選擇合適的封閉時間和濃度,對于提高ELISA試劑盒檢測的特異性和準確性非常重要。安徽認可ELISA試劑盒銷售價格濟南Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。

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ELISA試劑盒的靈敏度是其重要特性之一。高靈敏度意味著它能夠檢測到極低濃度的目標物質。這得益于ELISA反應中抗原-抗體特異性結合的高度親和性以及酶放大信號的作用。在一些疾病的早期診斷中,例如標志物的檢測,靈敏度高的ELISA試劑盒可以在發生早期,體內標志物含量極低時就檢測到其存在。例如前列腺特異抗原(PSA)的檢測,靈敏的ELISA試劑盒能夠檢測到納克級甚至更低濃度的PSA,有助于前列腺的早期篩查。此外,對于一些微量的細胞因子檢測,高靈敏度的ELISA試劑盒也能準確捕捉到其濃度變化,為免疫相關疾病的研究和診斷提供可靠數據。

從反應模式來看,ELISA試劑盒主要分為直接法、間接法、夾心法和競爭法。直接法是將酶直接標記在一抗上,操作簡單,但靈敏度相對較低。間接法是先加入未標記的一抗與抗原結合,再加入酶標記的二抗,由于二抗可以結合多個一抗分子,所以這種方法可提高靈敏度。夾心法適用于檢測大分子抗原,它利用兩種特異性抗體,一種包被在微孔板上,另一種標記酶,通過夾心結構特異性地捕獲和檢測抗原,具有很高的靈敏度和特異性。競爭法主要用于檢測小分子抗原或半抗原,樣本中的抗原和酶標記的抗原競爭與包被抗體結合,根據顯色程度判斷樣本中抗原的含量。底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。

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ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。您想購買進口ELISA試劑盒?上海伊麗薩生物科技代理眾多好品牌,祝您成功。遼寧包含什么ELISA試劑盒信息推薦

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ELISA試劑盒在標志物檢測方面具有廣泛的應用。例如,甲胎蛋白(AFP)是肝的重要標志物。ELISA試劑盒能夠檢測血液中AFP的含量,對于肝的早期篩查、診斷和病情監測非常有意義。胚抗原(CEA)可作為多種的標志物,尤其是結直腸、胃等消化系統。使用ELISA試劑盒檢測CEA水平,可以輔助醫生判斷的發生、發展以及效果。前列腺特異抗原(PSA)是前列腺的關鍵標志物,通過ELISA試劑盒對PSA的精確檢測,有助于前列腺的早期發現和疾病管理。標志物的檢測為的防治提供了重要的參考,而ELISA試劑盒以其高靈敏度和特異性在其中發揮著重要作用。遼寧認可ELISA試劑盒信息推薦