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金華醫學膜片鉗技術原理

來源: 發布時間:2023-07-11

膜片鉗使用操作流程及注意事項:1.實驗結束后必須關閉實驗室的水電,檢查實驗室門窗。2.凡是在本平臺使用儀器的同學必須履行實驗室相關要求,完成值日等相關工作(值日生按照實驗室統一所發值日生要求履職)。3.在儀器使用以前及使用之后按按照使用時長做好登記工作。4.拉制儀提前預熱(至少30min)。且用完及時關閉。電熱加熱線溫度很高,在使用時注意避免燙傷。4.電腦里面的軟件不得隨意刪改,不得在本機電腦下載別的軟件,拷數據時需用實驗室配置的U盤。5.禁止私拉電線,如有實驗要求可與老師及時溝通。膜片鉗使用的注意事項:浴槽及灌流系統用畢請及時清洗,防止長菌影響實驗。金華醫學膜片鉗技術原理

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膜片鉗的應用:對單細胞形態與功能關系的研究:將膜片鉗技術與單細胞逆轉錄多聚酶鏈是反應技術結合,在全細胞膜片鉗記錄下,將單細胞內容物或整個細胞(包括細胞膜)吸入電極中,將細胞內存在的各種mRNA全部快速逆轉錄成cDNA,再經常規PCR擴增及待檢的特異mRNA的檢測,借此可對形態相似而電活動不同的結果做出分子水平的解釋或為單細胞逆轉錄多聚酶鏈式反應提供標本,為同一結構中形態非常相似但功能不同的事實提供分子水平的解釋。金華細胞生物學膜片鉗全細胞記錄應用全自動膜片鉗系統技術指標:軟件的功能全部,可按照操作者設定的參數方案自動執行實驗。

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膜片鉗技術的基本原理和方法:膜片鉗使用的基本方法是,把經過加熱拋光的玻璃微電極在液壓推進器的操縱下,與清潔處理過的細胞膜形成高阻抗封接,導致電極內膜片與電極外的膜在電學上和化學上隔離起來,由于電性能隔離與微電極的相對低電阻(1~5MΩ),只要對微電極施以電壓就能對膜片進行鉗制,從微電極引出的微小離子電流通過高分辨、低噪聲、高保真的電流-電壓轉換放大器輸送至電子計算機進行分析處理。膜片鉗技術實現的關鍵是建立高阻抗封接,并能通過特定的記錄儀器反映這些變化。膜片鉗技術用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面,使之形成10~100MΩ的高阻封接。

膜片鉗技術及其應用:它是作者在\"膜片鉗技術及其應用\"領域所進行的研究工作的總結,同時也吸取了國際上的先進技術和新近的研究成果。內容包括:細胞電生理與膜片鉗技術,膜片鉗系統的組建及實驗技術概要,膜片鉗放大器原理與低噪聲設計,單通道和全細胞電流記錄技術,數據采集和分析,細胞分泌活動的膜電容監測技術和安培測量技術,細胞內鈣離子濃度的測量及鈣庫特性,腦切片膜片鉗技術,心肌細胞的藥理特性和植物細胞的離子通道特性。膜片鉗使用操作流程及注意事項:凡是在本平臺使用儀器的同學必須履行實驗室相關要求。

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膜片鉗電生理技術的記錄方式:全細胞記錄法,膜穿孔記錄法(perforatedpatchclamp),巨膜片鉗記錄法(giantmembranepatchclamp),松散封接記錄法(loosepatchclamp)等技術應用:1.為了更換電極內液和從電極內施加藥物,發展了微電極內灌技術(micropipetteperfusiontechnique)2.在研究細胞間的縫隙連接(gapjunction)通路時,發展了雙膜片鉗記錄法(doublepatchrecording)3.將富含神經遞質受體的游離膜片鉗靠近突觸部位,可檢測遞質釋放和突觸活動,這一技術稱為膜片鉗探針技術(detector-patchtechnique)4.將特異的膜片探針插入卵母細胞,可檢測細胞內第二信使含量,此為膜片填塞技術(patchcrammingtechnique)5.為研究細胞的胞吞與胞吐機制,發展了膜電容測定法(membranecapacitancemeasurement)。膜片鉗使用的注意事項:安裝玻璃微電極時,電極應與銀絲平行,防止刮蹭銀絲電極。溫州藥理學膜片鉗成像方案

全自動膜片鉗系統技術指標:外灌流時間常數:~200ms;內灌流時間常數:~2s。金華醫學膜片鉗技術原理

膜片鉗技術——打開細胞電生理之門:定義:膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”,是一種基于電工學和電化學原理的分析手段,可以通過檢測細胞的電信號(電生理性質)來研究化學物質、電、機械力等刺激因素對細胞功能的影響,從而幫助揭示細胞在生命活動中的化學和生物學機制。原理:膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由于電極與細胞膜的高阻封接,在電極籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離,因此,此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就替代單一離子通道電流。金華醫學膜片鉗技術原理

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